細(xì)菌總數(shù)是指1mL水樣在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，經(jīng)37℃、24h培養(yǎng)后所生長(zhǎng)的菌落數(shù)。計(jì)量單位一般是每mL水中所含有的總菌數(shù)。水中的細(xì)菌總數(shù)往往同水體受到有機(jī)物污染的程度有關(guān)，是評(píng)價(jià)水質(zhì)污染程度和對(duì)人體可能造成傷害的重要指標(biāo)之一。
細(xì)菌總數(shù)的分析方法采用標(biāo)準(zhǔn)平皿法對(duì)水樣中的細(xì)菌記數(shù)，這是一種測(cè)定水中好氧和兼性厭氧的異養(yǎng)菌密度的方法。但由于沒(méi)有任何一種營(yíng)養(yǎng)基或任一環(huán)境條件能滿足一個(gè)水樣中所有細(xì)菌的生理要求，而且水中細(xì)菌能以單獨(dú)個(gè)體、成對(duì)、鏈狀、成簇或成團(tuán)的形式存在，所以測(cè)得的菌落數(shù)實(shí)際上要低于被測(cè)水樣中真正存活的細(xì)菌數(shù)目。
用無(wú)菌操作法吸取1mL水樣或2～3個(gè)適宜稀釋倍數(shù)的稀釋水樣，注入滅菌平皿中，再傾注15mL營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基并與水樣充分混勻，每個(gè)水樣做兩個(gè)平行樣，另外每次檢驗(yàn)還要做只傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的空白對(duì)照。
培養(yǎng)之后，應(yīng)立即進(jìn)行平皿菌落計(jì)數(shù)。如果計(jì)數(shù)必須暫緩進(jìn)行，可將平皿存放于5～10℃的環(huán)境下，但不能超過(guò)24h，而且也不可以將這種做法當(dāng)作常規(guī)的操作方式。
對(duì)平皿菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀察，為防止遺漏，必要時(shí)應(yīng)用放大鏡檢查。對(duì)那些看來(lái)相似、距離相近但并不相觸的菌落，只要其距離小于最小菌落的直徑，就應(yīng)當(dāng)分別予以計(jì)數(shù)。對(duì)那些緊密接觸但外觀(形態(tài)或顏色)有差異的菌落也要分別予以計(jì)數(shù)。
在求同一稀釋度的平均菌落數(shù)時(shí)，如果其中一個(gè)平皿有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。如果片狀菌落不到平皿的一半、而其余部分菌落的分布又很均勻時(shí)，則可以將生長(zhǎng)均勻的1/2平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以2代表全皿菌落數(shù)。
細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定結(jié)果是以每個(gè)平皿菌落總數(shù)或同一稀釋度平行實(shí)驗(yàn)平皿的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。當(dāng)最終結(jié)果在100以內(nèi)時(shí)按實(shí)際菌落數(shù)記錄結(jié)果;大于100時(shí)，采用兩位有效數(shù)字，用10的指數(shù)來(lái)表示，如果菌落數(shù)無(wú)法計(jì)數(shù)，在報(bào)告結(jié)果時(shí)要注明稀釋倍數(shù)。
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